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雞肉中利巴韋林的檢測方案

更新時間:2022-05-28      瀏覽次數(shù):3949

一、 樣品前處理方法
        2g雞肉,加入15mL水,渦旋混勻,超聲提取10min,2000xg離心5min,取3mL上清進(jìn)行固相萃取,固相萃取柱為HyperSep HyperCarb 色譜柱(200mg/3mL,貨號60106-301),固相萃取步驟如下:
        活化:1mL 乙腈,1mL乙醇,負(fù)壓過柱
        上樣:3mL 上清液,1mL/min速率過柱
        洗脫:500μL 20%乙腈-水溶液洗脫,1mL/min
        洗脫兩次,合并洗脫液,直接進(jìn)行LC-MS/MS分析。
二、 樣品分析方法
1. 儀器

       Accela HPLC;TSuantum Access MAX 三重串聯(lián)四級桿質(zhì)譜檢測器;Hypercarb 液相色譜柱(100x2.1mm,5μm,貨號35005-102130)
2. 參數(shù)設(shè)置
    液相參數(shù):
            柱溫:室溫
            進(jìn)樣量:10μL
            梯度:

質(zhì)譜參數(shù):

        離子化模式:電噴霧電離,正離子模式;

        質(zhì)譜掃描方式:選擇反應(yīng)監(jiān)測(SRM);

        分辨率:單位分辨率;

        毛細(xì)管溫度:350℃;

        霧化溫度:350℃;

        噴霧電壓:3700V;

        鞘氣壓力:30 arb;

        輔助氣流速:10 arb;

        碰撞氣壓力:1.0 mTorr;

        離子對參數(shù)見下表:

3.色譜圖
    見圖1。

圖 1  雞肉加標(biāo)樣品檢測結(jié)果(利巴韋林濃度,1ppb;同位素內(nèi)標(biāo)濃度:1ppb)

三、 結(jié)果與討論
        利巴韋林為強(qiáng)極性化合物,使用水作為溶劑即可將其*提取。但常規(guī)色譜柱無法將其保留。Hypersep Hypercarb是Thermo Scientific*的固相萃取填料,基質(zhì)為具有平面結(jié)構(gòu)的多孔石墨化碳(PGC),能與極性化合物產(chǎn)生偶極-偶極相互作用而使其具有強(qiáng)保留性質(zhì),特別適合極性化合物的純化。
        本實(shí)驗中,使用HyperSep Hypercarb 進(jìn)行樣品的純化,可以得到滿意的回收率,在50ppb的加樣回收試驗中,回收率為121.8%,重現(xiàn)性良好。且方法簡單,與現(xiàn)有方法相比,避免了反復(fù)調(diào)節(jié)pH值的步驟。而且,使用20%乙腈即可將目標(biāo)物洗脫,避免在后繼的分析過程中產(chǎn)生明顯的溶劑效應(yīng)。
        在分析過程中發(fā)現(xiàn),利巴韋林色譜峰附近容易出現(xiàn)干擾物質(zhì),根據(jù)文獻(xiàn)判斷,可能為內(nèi)源性的異構(gòu)體。該異構(gòu)體容易使結(jié)果出現(xiàn)假陽性,但使用HyperCarb色譜柱,在極為簡單的流動相條件下,即可實(shí)現(xiàn)分離。

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