Acclaim液相色譜柱在使用前,先進行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行,只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。
本產(chǎn)品可適用范圍廣,從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離,在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學(xué),生藥學(xué)和天然產(chǎn)物化學(xué),生物物質(zhì)如多肽、蛋白、核酸等多個領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話:使用前要過濾,使用后要沖洗。具體方法如下:
1、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1、0ml/min流速沖洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0、2ml/min流速沖洗色譜柱過夜。
2、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1、0ml/min流速沖洗60min,再用該過渡流動相以1、0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,以避免梯度過程中緩沖鹽析出。
3、緩沖鹽析出的補救方法:
a、用甲醇/20/80以1、0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
b、用甲醇/水=20/80以0、2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。
使用Acclaim液相色譜柱可以延長色譜柱的壽命。但是考慮是否使用保護柱前,建議評估以下幾點:
(1)保護柱也不便宜,所以要考慮購買保護柱的費用是否能由所增加的色譜柱壽命補償回來;
(2)保護柱的壽命有多長?須注意何時需要換保護柱芯,不要因為更換太晚而污染到色譜柱;
(3)如何沖洗保護柱?沖洗時需要將保護柱和色譜柱分開沖洗,以免將累積在保護柱內(nèi)的不純物沖洗到色譜柱中;
(4)不要期望因為加了1-2cm的保護柱而會增加柱效。裝上保護柱雖然類似增加柱長,但是使用保護柱也增加了兩個接頭和連接管路,這些會造成儀器系統(tǒng)柱效減少,因此如果能維持不裝保護柱時的柱效就不錯了。